清除率为纵坐标作图

4、高效果腺体外抗氧化活性试验

（1）对DPPH自由基的液相氧化清除能力

以质量浓度为横坐标，清除率为纵坐标作图，色谱素得到各样品质量浓度与DPPH自由基清除率的法测关系，试验结果见图2～5。定黑由图2～5可知，肋花随着各样品质量浓度的楸提取物增加，对DPPH自由基的中氯清除率均逐渐升高。当黑果腺肋花楸提取物供试液浓度为186.40μg／mL，化矢含量矢车菊素-3-O-葡萄糖苷供试液浓度为15.04μg／mL，车菊氯化矢车菊素供试液浓度为5.19μg／mL，及抗究VC供试液的性研浓度为12.76μg／mL时，清除率均可达到50％，高效果腺试验结果见表3，液相氧化氯化矢车菊素对DPPH自由基的色谱素清除能力最强，黑果腺肋花楸提取物对DPPH自由基具有一定的清除活性。

（2）FRAP法测定总的抗氧化能力
以FeSO₄浓度C为横坐标，测得的吸光度A为纵坐标，进行线性拟合，得到FeSO₄标准曲线为：A=0.0262C一0.0275，R²=0.9996。将测得的样品吸光度值带入标准曲线方程，抗氧化活性以相同吸光度值的FeSO₄当量浓度表示，记为FRAP值。由图6～9可知，当VC样品液的浓度为7.27μg/mL，黑果腺肋花楸提取物供试液的浓度为157.7μg／mL，矢车菊素样品液浓度为11.35μg／mL，氯化矢车菊素样品液浓度为5.52μg/mL，硫酸亚铁当量浓度可达到30μg/mL，试验结果见表3，说明氯化矢车菊素的还原能力最强，黑果腺肋花楸提取物具有一定的还原能力。

（3）钼酸铵法测定总的抗氧化能力
以VC质量浓度为横坐标，测得的吸光度A为纵坐标，进行线性拟合，得到VC抗氧化能力标准曲线为：A=240.28C-101.67，R2=0.9966。将测得的样品吸光度值带入标准曲线方程，抗氧化活性以相同吸光度值的VC当量浓度表示。由图10～13可知，当氯化矢车菊素样品液的浓度为0.082mg／mL，黑果腺肋花楸花青素供试液的浓度为1.63mg／mL，矢车菊素样品液浓度为0.1722mg／mL，VC当量浓度可达到30μg／mL，试验结果见表3，说明说明氯化矢车菊素的还原能力最强，黑果腺肋花楸提取物具有一定的还原能力。
 

三、结论与讨论

1、本试验对黑果腺肋花楸提取物中氯化矢车菊素含量的HPLC测定方法进行考察，结果表明建立的含量测定方法操作简便，精密度高，重复性及线性关系良好；

2、本试验采用酸化甲醇溶液经沸水浴水解提取花青素，在相关文献的基础上，通过正交试验进一步考察了水解提取花青素工艺参数，试验结果表明，最佳提取工艺为：水解温度100℃、水解时间2h、溶剂酸浓度3％盐酸甲醇。在优化水解提取条件下，氯化矢车菊素的含量为1.8570mg／g。该方法操作简单，具有快速、高效、环保等优点，为黑果腺肋花楸果活性成分的提取提供了一种新方法；

3、体外抗氧化活性的试验结果表明：黑果腺肋花楸提取物对DPPH自由基具有一定的清除活性，随着其质量浓度的增加，清除活性明显增强，并且氯化矢车菊素对DPPH自由基的清除能力强于黑果腺肋花楸提取物；FRAP法和钼酸铵法测定各样品液总还原力，结果表明黑果腺肋花楸提取物具有一定的抗氧化活性，两种测定方法中氯化矢车菊素的抗氧化性最强。上述试验结果为黑果腺肋花楸果在食品、饮料、制药等领域的应用提供了工作基础，为黑果腺肋花楸果的工业化生产提供了理论依据。

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